Diagnostische Leistung von Strongyloides

Parasites & Vectors Band 16, Artikelnummer: 298 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Der Nachweis von parasitenspezifischem IgG im Urin ist eine empfindliche Methode zur Diagnose von Strongyloidiasis und liefert eine ähnliche Genauigkeit wie Serum-IgG. Es liegen jedoch keine Daten zum Nachweis der IgG-Subklasse im Urin vor. Um den Nutzen der Diagnose anhand von Urinproben weiter zu untersuchen, haben wir die diagnostische Leistung von IgG4 im Urin im Vergleich zu parasitologischen und anderen immunologischen Methoden bewertet.

Der Urin und die Seren umfassten nachgewiesene Strongyloidiasis (Gruppe 1, n = 93), andere parasitäre Infektionen (Gruppe 2, n = 40) und negative Parasiten (Gruppe 3, n = 93). Die Leistung von Strongyloides-spezifischem IgG4 im Urin zur Diagnose von Strongyloidiasis wurde anhand von Stuhluntersuchungen als Referenzstandard bewertet.

Bei der Stuhluntersuchung als Goldstandard wies Strongyloides-spezifisches IgG4 im Urin eine Sensitivität von 91,4 % und eine Spezifität von 93,2 % auf, während Serum-IgG4 eine Sensitivität von 93,6 % und eine Spezifität von 91,0 % aufwies. IgG4 sowohl im Urin als auch im Serum stimmte nahezu perfekt diagnostisch mit der Stuhluntersuchung überein (Cohens Kappa-Koeffizient war > 0,8). Kreuzreaktivität zu Opisthorchis viverrini und Taenia spp. Die Konzentration von IgG4 im Urin betrug 7,5 % und im Serum 12,5 %. Gleichzeitige Analysen des Gesamt-IgG in Urin und Serum zeigten, dass die Sensitivitäten (97,9–100 %) und Spezifitäten (88,7–91,0 %) ähnlich waren (P > 0,05). Die Sensitivität für die parasitologische Untersuchung mit der Formalin-Ethylacetat-Konzentrationstechnik (FECT) betrug 49,5 % und die der Agarplattenkulturtechnik (APC) 92,6 %.

Unsere Ergebnisse zeigten, dass der spezifische IgG4-Nachweis im Urin eine ähnliche diagnostische Leistung erbrachte wie die gleichen Biomarker im Serum. Dies legt nahe, dass eine genaue Diagnose der Strongyloidiasis anhand von Urinproben durchgeführt werden kann und IgG4 ein gültiger diagnostischer Marker der Wahl ist. Weitere Untersuchungen sind erforderlich, um den Nutzen von Urin-IgG4 zur Messung des Ansprechens auf die Behandlung bei Strongyloidiasis zu beurteilen.

Strongyloidiasis ist eine vernachlässigte Tropenkrankheit (NTD), die durch eine Infektion mit dem Nematoden Strongyloides stercoralis verursacht wird. Die Übertragung des Parasiten erfolgt weltweit in tropischen und subtropischen Regionen [1, 2]. In Südostasien wurden S. stercoralis-Infektionen beim Menschen in Thailand, Laos, Vietnam und Kambodscha gemeldet [1,2,3,4]. Das Potenzial für eine Autoinfektion besteht, wenn sich entwickelnde fadenförmige Larven von S. stercoralis denselben Wirt erneut infizieren, was zu einer lebenslangen Infektion führt. Strongyloidiasis verläuft normalerweise asymptomatisch, zeigt jedoch gelegentlich Manifestationen einschließlich gastrointestinaler und dermatologischer Symptome; In Fällen, in denen die Immunität des Wirts geschwächt ist, kann es zu einer Hyperinfektion und einer tödlichen disseminierten Strongyloidiasis kommen [5,6,7].

Eine sensible und spezifische Diagnose einer S. stercoralis-Infektion ist für den Beginn einer Behandlung erforderlich, um Krankheitskomplikationen vorzubeugen und die Überwachung und Kontrolle der Strongyloidiasis zu verbessern. Stuhluntersuchungen wie die Agarplattenkultur (APC) und die Baermann-Technik gelten als „Goldstandard“-Diagnosemethoden für S. stercoralis-Infektionen. Aufgrund der häufig geringen Larvendichte und der hohen täglichen Schwankung der Larvenproduktion im Kot weisen beide jedoch eine geringe Empfindlichkeit auf. Zur Verbesserung der Empfindlichkeit wird eine wiederholte Stuhluntersuchung empfohlen, sie kann jedoch für Patienten und Laborpersonal logistisch schwierig sein [8, 9]. Um die geringe Sensitivität zu mildern, wurden mehrere alternative Diagnosemethoden entwickelt, die meist immunologische Methoden wie den Antigen- oder Antikörpernachweis in Serum, Speichel und Urin nutzen [10,11,12,13]. Molekulare Methoden wurden auch zum Nachweis von S. stercoralis-DNA mit unterschiedlicher Empfindlichkeit in Stuhl- (75–100 %) und Urinproben (77,1 %) und Spezifität (67,8 % im Urin und 80–90 % im Stuhl) eingesetzt [14, 15]. . Für molekulare Methoden sind kostspielige Reagenzien und spezielle Einrichtungen erforderlich. Daher ist es in Ländern, in denen die Ressourcen begrenzt sind und Strongyloidiasis weit verbreitet ist, wichtig, bequemere und kostengünstigere Methoden zu entwickeln [14,15,16].

Die Entnahme von Urinproben ist nicht-invasiv und für Patienten bequemer als die Entnahme von Blut- oder Stuhlproben. Der Nachweis parasitenspezifischer IgG-Antikörper im Urin wurde kürzlich als Methode zur Diagnose von Strongyloidiasis etabliert und erbrachte eine ähnliche diagnostische Genauigkeit wie Serumtests, die beide empfindlicher sind als die Stuhluntersuchung [8, 11]. Frühere Studien berichteten, dass mehrere parasitäre Infektionen starke IgG4-Reaktionen hervorriefen, die mit asymptomatischen und chronischen Infektionen, einschließlich Filariose, Strongyloidiasis und Schistosomiasis, verbunden waren [17,18,19,20,21]. Der Nachweis von spezifischem IgG4 wurde zur Diagnose von Strongyloidiasis mithilfe verschiedener Plattformen verwendet, einschließlich des Lateral-Flow-Assays und der ELISA-Plattform [18, 20, 22, 23, 24, 25]. Parasitenspezifisches IgG4 ist bekanntermaßen hochspezifisch für die Diagnose von Strongyloidiasis, insbesondere bei chronisch infizierten Personen [13]. Darüber hinaus wurde IgG4 verwendet, um die Wirksamkeit einer medikamentösen Behandlung zu beurteilen: Ein anhaltender spezifischer IgG4-Spiegel nach Albendazol-Behandlung deutete auf ein Versagen der Behandlung von Strongyloidiasis hin [26, 27]. Allerdings wurde nicht über den Nachweis von Strongyloides-spezifischem IgG4 im Urin zur Diagnose einer Strongyloidiasis berichtet. Wir gehen davon aus, dass Messungen von IgG4 im Urin eine ähnliche qualitative und quantitative Diagnose ermöglichen wie Messungen im Serum bei Strongyloidiasis.

Ziel dieser Studie ist die Entwicklung eines indirekten ELISA zum Nachweis von spezifischem IgG4 in Urinproben und die Bewertung der diagnostischen Leistung dieses Ansatzes bei Strongyloidiasis. Diagnostische Übereinstimmung und quantitative Korrelationen zwischen spezifischem IgG4 in Serum und Urin werden analysiert. Darüber hinaus wird die diagnostische Leistung des spezifischen Gesamt-IgG im Serum- und Urinnachweis anhand der Stuhluntersuchung mittels der Agarplattenkulturtechnik (APC) und der Formalin-Ethylacetat-Konzentrationstechnik (FECT) als Goldstandardmethoden bewertet. Die Ergebnisse dieser Studie zeigten, dass der Nachweis von spezifischem IgG4 im Urin eine hohe diagnostische Leistung ähnlich der von Serum-IgG4 und eine höhere Spezifität als Gesamt-IgG in Serum- und Urinproben aufwies, was auf sein Potenzial als immunologischer Marker für die Diagnose von Strongyloidiasis hinweist.

Bei dieser Studie handelte es sich um eine Querschnittsstudie zum Screening auf Strongyloidiasis mittels parasitologischer und immunologischer Methoden im Rahmen der Langzeit-Kohortenstudie zur Opisthorchiasis. Die Zulassungskriterien für die Rekrutierung und Aufnahme in die Studie waren (i) die Teilnehmer waren Einheimische im Unterbezirk Thung Chomphu, Bezirk Phuwiang, in der Provinz Khon Kaen, nordöstlich von Thailand; (ii) die Teilnehmer stimmten zu, klinische Proben, einschließlich Kot, Blut und Urin, für Index- und Standard-Referenztests zu spenden; (iii) die Teilnehmer waren derzeit gesund und hatten keine klinischen Anzeichen oder Symptome einer Leber- oder Nierenerkrankung. Da es akzeptabler ist, Urinproben aus der Studienpopulation zu entnehmen als Blut-/Serumproben, verwendeten wir für die Berechnung der Probengröße einen Rahmen für Nichtunterlegenheitsversuche, bei dem die erwartete Sensitivität 95 % für Serum-IgG und 90 % für Urin-IgG betrug. Angesichts einer akzeptablen Nichtunterlegenheitsspanne von 5 % zwischen Serum- und Urindiagnostik haben wir berechnet, dass eine Stichprobengröße von 55 positiven Personen ausreicht, um die Nichtunterlegenheit zwischen den beiden Diagnostiken unter Verwendung einer einseitigen Signifikanzschwelle von 5 % zu bestimmen. Wenn die Nichtunterlegenheitsspanne auf 10 % erweitert wird, sinkt die erforderliche Anzahl positiver Fälle auf 25 Personen. Angesichts einer zuvor erwarteten Prävalenz von S. stercoralis in der Gemeinde von 30 % ergab dies eine erforderliche Stichprobengröße bei der Rekrutierung von 183 Teilnehmern.

Insgesamt erfüllten 504 Teilnehmer das Einschlusskriterium und 226 stellten vollständige klinische Proben zur Verfügung (Abb. 1). Es gab keinen statistischen Unterschied in den demografischen Daten (Alter und Geschlecht) zwischen den eingeschriebenen Teilnehmern und der Anzahl der Personen, die vollständige Probensätze einreichten. In Gruppen negativer S. stercoralis-Larven wurde Strongyloides-spezifisches IgG im Serum durch NIE-basiertes ELISA und Ss-basiertes ELISA bestätigt.

Das Flussdiagramm des Studienansatzes zeigte die Anzahl der Teilnehmer, die in drei Gruppen aufgeteilt waren: Gruppe 1, nachgewiesene Strongyloidiasis mit Strongyloides stercoralis-Larven im Kot; Gruppe 2, andere Parasiteninfektionen; Negative Parasiten der Gruppe 3

Rekrutierte Teilnehmer wurden gebeten, klinische Proben, dh Kot, Urin und Serum, zur Verfügung zu stellen. Von jedem Teilnehmer wurden zehn Gramm Stuhlprobe in einem sauberen Weithalsbehälter gesammelt. Jede Stuhlprobe wurde für APC und die Formalin-Ethylacetat-Konzentrationstechnik (FECT) in Aliquots aufgetrennt. Für die Urinprobe wurden von jedem Teilnehmer 10 ml erster Morgenurin entnommen und in einem Reagenzglas mit NaN3 (0,1 %) aufbewahrt. Jede Urinprobe wurde in eine Mikrotiterplatte überführt und bei 4 °C aufbewahrt, bis sie benötigt wurde. Fünf Milliliter Blut von jedem Teilnehmer wurden in 10-ml-Serumtrennröhrchen (Gerinnungsaktivatorröhrchen) (BD, UK) gesammelt. Aliquote von 500 µl wurden zur Bestimmung des Gesamt-IgG- und IgG4-Spiegels mittels ELISA in neue 1,5-ml-Mikrozentrifugenröhrchen überführt.

Die beiden Stuhluntersuchungsmethoden zur Beurteilung parasitärer Infektionen waren FECT und APC. Für die FECT wurden zwei Gramm Stuhlprobe verarbeitet [28]. Kurz gesagt, mit Formalin fixierte Proben wurden durch Gaze filtriert und Ethylacetat wurde als Fettextraktor aus dem Kot verwendet. Nach 5-minütiger Zentrifugation bei 500 × g wurde der Überstand entfernt und das Sediment in 1 ml 10 % Formalin suspendiert. Drei Tropfen der fertigen Stuhlsuspension wurden entnommen und auf Parasiten untersucht. Die Anzahl der Larven pro Gramm (LPG) Kot wurde auf der Grundlage von 2 g Kot berechnet und dargestellt. Die APC-Methode gilt seit langem als Referenzstandard für den Nachweis von S. stercoralis [29]. Ungefähr 4 g Kot jedes Teilnehmers wurden auf eine 1,5 %ige Nähragarplatte in einer Plastik-Petrischale gegeben und 2–4 Tage bei 25 °C inkubiert. Die Platten wurden unter einem Stereomikroskop auf das Vorhandensein von Würmern untersucht. Anschließend wurden die Platte und die Unterseite jedes Deckels mit 10 % Formalin gewaschen; Die Waschlösungen wurden in ein Zentrifugenröhrchen überführt und mit einem Mikroskop untersucht, um zwischen S. stercoralis-Stadien und Hakenwürmern zu unterscheiden. Das Laborpersonal, das den Eingriff durchführte, war hinsichtlich der Proben-IDs und Labordaten der Teilnehmer blind.

Die Gesamtzahl der mittels FECT analysierten Stuhlproben betrug 226, wobei 174 Proben für die APC-Analyse ausreichend waren. Die Proben von 52 Teilnehmern wurden wegen unzureichender Probenmenge bei der APC-Analyse nicht berücksichtigt. Die endgültige Anzahl fäkalpositiver Proben, die als nachgewiesene Strongyloidiasis herangezogen wurden, war eine Kombination aus FECT und/oder APC (n = 93).

Bei den indizierten Tests handelte es sich um einheitenbasierte ELISA-Protokolle für IgG; Als Antigen wurde das zuvor beschriebene Strongyloides ratti mit geringfügigen Modifikationen verwendet [11, 12]. Die 96-Well-Platten wurden über Nacht bei 4 °C mit 2,5 μg/ml S. ratti-Antigen beschichtet. Die Platten wurden zweimal mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) mit 0,05 % Tween-20 (pH 7,2) gewaschen, bevor sie 2 Stunden lang bei Umgebungstemperatur mit 3 % Magermilch in PBS mit 0,5 % Tween-20 blockiert wurden. Einhundert Mikroliter unverdünnter Urin oder verdünnte Serumproben (1:8000 verdünnt) wurden zugegeben und 1 Stunde bei 37 °C inkubiert. Nach dreimaligem Waschen der Platten wurden 100 µl Meerrettich-Peroxidase-Konjugat-Ziegen-Antihuman-IgG (Abcam, USA) zugegeben und 1 Stunde bei 37 °C inkubiert. Nach dreimaligem Waschen wurde das OPD-Substrat (Sigma-Aldrich, USA) in Citrat-Phosphat-Puffer pH 5,0 (100 µl/Vertiefung) zugegeben und die Platten 1 Stunde lang bei Raumtemperatur in einem angefeuchteten dunklen Behälter inkubiert. Abschließend wurde die Reaktion durch Zugabe von 4 N Schwefelsäure (50 µl/Vertiefung) gestoppt und die optische Dichte (OD) bei 492 nm mit einem ELISA-Lesegerät (TECAN Sunrise, Österreich) gemessen. Die OD wurde basierend auf einer Standardkurve, die aus Reihenverdünnungen gepoolter positiver Serumproben erstellt wurde, in beliebige Antikörpereinheiten (pro ml Urin oder Serum) umgewandelt [11, 12].

Die optimalen Bedingungen für die IgG4-indizierten Tests in Urin und Serum wurden in der Optimierungsstudie vorab ermittelt. Rohes S. ratti-Antigen (10 µg/ml) wurde zum Beschichten der Vertiefungen in 96-Well-Mikrotiterplatten bei 4 °C über Nacht verwendet. Die Platten wurden zweimal (jeweils 30 Sekunden) mit PBS, pH 7,2, enthaltend 0,05 % Tween-20, gewaschen, bevor sie 2 Stunden lang bei Umgebungstemperatur mit 3 % Magermilch in PBS, enthaltend 0,5 % Tween-20, blockiert wurden. Der Urin (100 µl unverdünnt) oder die verdünnten Serumproben (100 µl einer 1:40-Verdünnung) wurden in die Vertiefungen gegeben und 1 Stunde bei 37 °C inkubiert. Nach dem dreifachen Waschen der Platte wurden 100 µl verdünntes Meerrettich-Peroxidase-Konjugat-Ziegen-Antihuman-IgG4 (Invitrogen, USA) in einer Verdünnung von 1:1000 zugegeben und 1 Stunde lang bei 37 °C inkubiert. Nach drei Wäschen wurden 100 µl/Vertiefung des TMB-Substrats (3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin) zugegeben und bei Umgebungstemperatur 30 Minuten lang in befeuchteten dunklen Behältern inkubiert. Abschließend wurde die Reaktion durch Zugabe von 4 N Schwefelsäure (50 µl/Vertiefung) gestoppt und die OD-Werte wurden bei 450 nm mit einem ELISA-Lesegerät (TECAN Sunrise, Österreich) gemessen. Ähnlich wie bei IgG im Urin wurden die OD-Werte durch die Standardkurve für IgG4 in Antikörpereinheiten umgewandelt. Das an der Studie beteiligte Laborpersonal hatte keinen Zugriff auf die Urin- und Serumcodes oder die klinischen Informationen der Teilnehmer.

Die Verteilung der Daten in Bezug auf Antikörpereinheiten wurde vor der Durchführung der statistischen Analyse mithilfe des Kolmogorov-Smirnov-Tests (KS) auf statistische Verteilung untersucht. Wenn die Daten nicht normalverteilt waren, wurden sie mithilfe logarithmisch transformierter Daten, log10 (1 + Einheit), normalisiert. Die Wirkung von Opisthorchis viverrini und anderen parasitären Infektionen auf die Antikörpereinheiten für spezifisches IgG4 und IgG in Serum und Urin, die nicht normal verteilt waren, wurde mithilfe des Mann-Whitney-U-Tests bewertet. Der Spearman-Rangkorrelationstest wurde verwendet, um die Korrelation von spezifischem IgG und IgG4 zwischen Urin und Serum zu bewerten.

Die Grenzwerte für spezifisches IgG4 und IgG in Urin und Serum mittels S. ratti-basiertem ELISA wurden durch eine Receiver-Operating-Characteristic-Analyse (ROC) mit Medcalc Version 11.6.1.0 basierend auf der Analyse von 40 nachweislich positiven und 40 nachweislich negativen Seren bestimmt Proben für S. stercoralis. Die Fläche unter der Kurve (AUC) gibt an, wie gut ein Parameter zwischen zwei diagnostischen Gruppen unterschieden werden kann, und der Cutoff wurde für höchste Sensitivität und Spezifität berechnet [12, 32, 33]. Die Grenzwerte (Antikörpereinheiten/ml Urin oder Serum) für spezifisches IgG4 betrugen 12,35 im Urin und 295,1 im Serum. Für spezifisches IgG lagen die Grenzwerte im Urin bei 184,3 und im Serum bei 251,4. Die positiven Raten verschiedener indizierter Tests wurden mithilfe des McNemar-Tests verglichen. Darüber hinaus lag der Cutoff des S. stercoralis-basierten ELISA (Ss-basierten ELISA) bei 208,1 und der NIE-basierte ELISA bei 251,1.

Die diagnostische Sensitivität und Spezifität von spezifischem IgG und IgG4 in Serum, Urin sowie APC und FECT wurden anhand der kombinierten Ergebnisse von APC und/oder FECT für fäkal positive Strongyloidiasis berechnet und als Referenzstandard verwendet. Die Sensitivität und Spezifität jedes Tests wurden mit Medcalc Version 11.6.1.0 berechnet. Die Daten zur Sensitivität und Spezifität wurden mit dem McNemar-Test verglichen. Paarweise Vergleiche der AUC-Werte wurden mit dem DeLong-Test ausgewertet [34].

Die Übereinstimmung der Diagnosemethoden wurde mithilfe des Cohen-Kappa-Koeffizienten (κ) bewertet, wobei ein Wert < 0,2 als leichte Übereinstimmung gilt, 0,21–0,40 als mittelmäßige Übereinstimmung, 0,41–0,60 als mäßige Übereinstimmung, 0,61–0,80 als erhebliche Übereinstimmung und > angesehen wird 0,80 ist eine nahezu perfekte Übereinstimmung [30, 31]. Die statistischen Analysen der in dieser Studie erhaltenen Daten wurden mit SPSS v.26.0 durchgeführt. Die Ergebnisse statistischer Tests wurden als signifikant angesehen, wenn P < 0,05.

Die Positivrate von S. stercoralis lag laut APC bei 43,1 % (75 von 174 Proben) und bei 20,4 % laut FECT (46 von 226 Proben). Von den APC-positiven Proben (75 Proben) waren 28 Proben (37,3 %) auch durch FECT positiv, während 47 Proben (62,7 %) nur durch APC positiv waren. Sechs Proben (13 %) waren bei FECT positiv, bei APC jedoch negativ. Die Gesamtprävalenz einer S. stercoralis-Infektion betrug 41,2 %, basierend auf positiven Ergebnissen durch APC oder FECT (93 von 226 Personen). Die durch FECT geschätzte Infektionsintensität (geometrisches Mittel ± SE, n = 46) betrug 12,6 ± 3,4 Larven pro Gramm Kot. Andere parasitäre Infektionen umfassten 61 Personen mit O. viverrini (27,0 %), 8 mit Taenia spp. (3,5 %) und 2,7 % bei Hakenwürmern und winzigen Darmegeln, 3 bei Echinostoma spp. (1,3 %) und 1 mit Trichuris trichiura (0,4 %).

Zur immunologischen Analyse wurden die Teilnehmer entsprechend der Stuhluntersuchung mittels APC und FECT in drei Gruppen eingeteilt (Tabelle 1). Gruppe 1 umfasste mit S. stercoralis infizierte Personen und Personen, die gleichzeitig eine Infektion mit S. stercoralis und anderen Parasiten hatten (n = 93), Gruppe 2 umfasste Personen mit anderen Parasiteninfektionen, die bei der Stuhluntersuchung negativ auf S. stercoralis waren (n = 40). ), darunter 37 Individuen mit O. viverrini, 4 mit Taenia spp., 3 mit Echinostoma spp. und 1 mit kleinem Darmegel und Hakenwurm; Gruppe 3 bestand aus Parasiten-negativen Personen (n = 93).

Die Anzahl der Personen in jeder Gruppe, die unter Verwendung von Gesamt-IgG und IgG4 positiv auf Strongyloidiasis getestet wurden (226 getestete Personen), ist in der Zusatzdatei 1: Tabelle S1 aufgeführt. Die Erkennungsraten bei nachgewiesenen Strongyloidiasis-Fällen (Gruppe 1) unter Verwendung von IgG4 in Urin (91,4 %) und Serum (93,5 %) waren ähnlich (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 0,604, df = 1, P > 0,05). Für spezifisches IgG in Serum und Urin betrug der Nachweis einer S. stercoralis-Infektion 100 % bzw. 97,8 %, und diese waren ähnlich (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 2,022, df = 1, P > 0,05). Bei der Analyse von Proben von Personen mit anderen parasitären Infektionen (Gruppe 2) waren die positiven Raten von IgG4 in Urin und Serum ähnlich (7,5–12,5 %) (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 1,287, df = 1 , P > 0,05) und denen von IgG in Urin und Serum (10,0–12,5 %) (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 0,635, df = 1, P > 0,05), diese unterschieden sich jedoch nicht signifikant. Bei Parasiten-negativen Personen (Gruppe 3, Zusatzdatei 1: Tabelle S1) betrugen die Nachweisraten von IgG4 6,5 % im Urin und 7,5 % im Serum (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 21,8, df = 1, P > 0,05). Beim IgG-Nachweis betrugen die positiven Raten 11,8 % im Urin und 7,5 % im Serum (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 49,3, df = 1, P > 0,05).

Insgesamt waren die positiven Nachweisraten mit IgG4 in Urin (41,6 %) und Serum (43,8 %) ähnlich (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 135,7, df = 1, P > 0,05). Ähnliche positive Raten wurden auch für IgG im Urin (46,9 %) und Serum (46,5 %) beobachtet (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 169,8, df = 1, P > 0,05). Betrachtet man die verschiedenen Arten von Immunglobulinen, die zum Testen derselben klinischen Proben verwendet wurden, ergab IgG höhere positive Raten als IgG4 in Urinproben (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 160,95, df = 1, P < 0,01).

Die Leistungen der indizierten Tests, d. h. spezifisches IgG4 und IgG in Serum und Urin zur Diagnose von Strongyloidiasis, sowie die standardmäßigen parasitologischen Methoden sind in Tabelle 2 aufgeführt. In Bezug auf eine positive Stuhluntersuchung (Personen, die positiv auf FECT und/oder APC getestet wurden, Nr = 93) war die Empfindlichkeit von IgG4 im Urin (91,4 %) ähnlich der von IgG4 im Serum (93,6 %). Für Schätzungen der diagnostischen Spezifität basierend auf der anderen parasitären Infektion in Gruppe 2 (n = 40) und endemisch negativen Teilnehmern in Gruppe 3 (n = 93) war die Spezifität von IgG4 im Urin (93,2 %) etwas höher als die im Serum ( 91,0 %) ohne signifikanten Unterschied (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 25,5, df = 1, P > 0,05). Für spezifisches IgG in Urin und Serum waren die Empfindlichkeiten ähnlich (97,9–100 %). Die Spezifität des spezifischen IgG im Serum betrug 91,0 % und die im Urin 88,7 % (McNemar-Test, \(\chi\)2 = 29,2, df = 1, P > 0,05). Die Sensitivität der FECT betrug 49,5 % und die der APC 92,6 %.

Die durch ROC-Analyse berechneten AUCs für IgG4 im Urin (AUC = 0,923, 95 %-KI 0,882–0,964) und im Serum (AUC = 0,923, 95 %-KI 0,882–0,963) waren ähnlich (DeLong-Test, P > 0,05). Die AUCs von IgG im Urin (AUC = 0,933, 95 %-KI 0,897–0,969) und im Serum (AUC = 0,955, 95 %-KI 0,926–0,984) waren ebenfalls ähnlich (DeLong-Test, P > 0,05).

Die diagnostische Übereinstimmung zwischen IgG4-Nachweis und Stuhluntersuchung (kombinierte APC und FECT) wurde mithilfe des Cohen-Kappa-Koeffizienten (κ) bewertet (Tabelle 3). Dabei wurden nahezu perfekte Übereinstimmungen zwischen der Stuhluntersuchung und dem Urin-IgG4 (Cohen-Kappa-Koeffizient, κ = 0,845, 95 %-KI 0,770–0,910, P < 0,001) und Serum-IgG4 (Cohen-Kappa-Koeffizient, κ = 0,837, 95 %-KI 0,762–0,911) festgestellt. P < 0,001). Die Übereinstimmung zwischen Urin-IgG4 und Serum-IgG4 war erheblich (Cohens Kappa-Koeffizient, κ = 0,774, 95 %-KI 0,686–0,855, P < 0,001). Für IgG in Tabelle 4 war die Übereinstimmung mit der Stuhluntersuchung (APC und FECT) nahezu perfekt für Urin (Cohens Kappa-Koeffizient, κ = 0,848, 95 %-KI 0,777–0,911, P < 0,001) und Serum-IgG (Cohens Kappa-Koeffizient, κ). = 0,892, 95 %-KI 0,832–0,946, P < 0,001). Urin-IgG und Serum-IgG stimmten nahezu perfekt überein (Cohen-Kappa-Koeffizient, κ = 0,867, 95 %-KI 0,796–0,929, P < 0,001).

Da O. viverrini im Untersuchungsgebiet ebenfalls endemisch vorkommt, muss untersucht werden, ob eine Infektion durch O. viverrini sowie andere parasitäre Infektionen die Ergebnisse von Serum- und Urin-ELISA beeinflussen können. Die Antikörperspiegel (Strongyloides-spezifisches IgG4 und IgG) wurden zwischen Proben, die positiv auf S. stercoralis allein waren, und Proben, die positiv auf S. stercoralis mit anderen gleichzeitigen Parasiteninfektionen waren, verglichen. Unter den Strongyloidiasis-Teilnehmern (Gruppe 1, n = 93) waren 33 Personen mit O. viverrini und anderen Parasiten koinfiziert. Es gab keine Unterschiede in den IgG4-Antikörperspiegeln im Urin zwischen der Monoinfektion von S. stercoralis und denen mit gemischter Infektion von S. stercoralis mit anderen Parasiten (Mann-Whitney U-Test, U = 891, Z = − 0,795, P = 0,4296). (Abb. 2A). Ähnliche Ergebnisse wurden für IgG4 im Serum zwischen einer Infektion mit S. stercoralis allein und solchen mit einer Infektion mit S. stercoralis gemischt mit anderen Parasiten beobachtet (Mann-Whitney-U-Test, U = 854,5, Z = − 1,088, P = 0,2790) (Abb. 2B). ).

Messungen von IgG4 im Urin (A) und IgG4 im Serum (B) bei Personen mit ausschließlich parasitologisch bestätigter Strongyloidiasis (n = 60) und solchen mit Mischinfektionen von Strongyloides stercoralis stercoralis und anderen parasitären Infektionen (n = 33). Zwischen diesen Gruppen gab es keinen signifikanten Unterschied in den Antikörperspiegeln für IgG4 sowohl im Serum als auch im Urin. Die gepunktete Linie zeigt den Grenzwert jeder Diagnosemethode an

Um die Kreuzreaktivität des IgG- und IgG4-Nachweises in Serum und Urin mit anderen parasitären Infektionen (Gruppe 2; n = 40) zu beobachten, wurden Teilnehmer analysiert, bei denen parasitologisch bestätigt wurde, dass sie andere parasitäre Infektionen hatten. Die in Gruppe 2 nachgewiesenen Parasiten waren O. viverrini (n = 37), Taenia spp. (n = 4), Echinostoma spp. (n = 3), kleine Darmegel (n = 1) und Hakenwurm (n = 1). Eine Kreuzreaktivität von spezifischem IgG4 wurde bei 3 von 37 Personen (8,1 %) im Urin und bei 5 von 37 Personen (13,5 %) im Serum mit O. viverrini beobachtet. Kreuzreaktivität bei Taenia spp. Eine Infektion trat bei einem von vier Teilnehmern (25,0 %) im Urin-IgG4 und bei zwei von vier Teilnehmern (50,0 %) im Serum-IgG4 auf (Abb. 3A, B). Beim IgG-Nachweis wurden bei 4 von 37 Personen (10,8 %) im Urin und bei 5 von 37 Personen (13,5 %) im Serum Kreuzreaktionen mit O. viverrini festgestellt. Der IgG-Nachweis war bei einer von fünf Personen mit Taenia spp. positiv. im Urin (25,0 %). Bei einem Teilnehmer mit Hakenwurminfektion wurde festgestellt, dass IgG im Urin positiv war, jedoch nicht im Serum (Abb. 3C, D). Für IgG4 im Urin oder Serum wurde keine Kreuzreaktion mit einem Fall einer Hakenwurminfektion festgestellt.

Konzentrationen von Strongyloides-spezifischen Antikörpern in Proben von Personen, die mit Strongyloides stercoralis und anderen Parasiten infiziert sind. Die Konzentrationen von Urin-IgG4 (A), Serum-IgG4 (B), Urin-IgG (C) und Serum-IgG (D) bei Personen, die mit Ss S. stercoralis, Ov Opisthorchis viverrini, Ech Echinostoma spp., T Taenia spp., MIF infiziert sind winzige Darmegel, Hw-Hakenwurm. Die gepunktete Linie zeigt den Grenzwert jeder Diagnosemethode an

Die Beziehungen zwischen spezifischem IgG4 und IgG-Antikörpern in Serum und Urin bei fäkal positiver Strongyloidiasis wurden analysiert (n = 93) (Abb. 4). Es wurde eine statistisch signifikante Korrelation zwischen dem IgG4-Spiegel im Urin und im Serum gefunden (Spearman-Korrelationskoeffizient, rs = 0,5466, P < 0,001) (Abb. 4A). Es gab eine ähnliche Korrelation zwischen den IgG-Spiegeln im Urin und im Serum (Abb. 4B) (Spearman-Korrelationskoeffizient, rs = 0,2898, P < 0,01). Darüber hinaus gab es signifikante positive Korrelationen zwischen IgG und IgG4 im Urin (Spearman-Korrelationskoeffizient, rs = 0,7073; P < 0,001, Abb. 4C) und im Serum (Spearman-Korrelationskoeffizient, rs = 0,5314; P < 0,001, Abb. 4D). ).

Korrelationen zwischen IgG4-Spiegeln in Urin und Serum (A), IgG in Urin und Serum (B), zwischen IgG und IgG4 im Urin (C) und zwischen IgG und IgG4 im Serum (D). Die Korrelationskoeffizienten wurden mithilfe des Spearman-Korrelationstests (rs) bestimmt. Die angezeigten Daten sind beobachtete Werte und die durchgezogene Linie wurde aus der Regressionsgleichung berechnet (Y = ax + b, Y = log IgG/IgG4, a = Steigung, x = log IgG/IgG4, b = Y-Achsenabschnitt). Gepunktete Linien (vertikal und horizontal) stellen die Grenzwerte dar

Um die geringe diagnostische Sensitivität der Stuhluntersuchung auszugleichen, sind empfindliche und spezifische Methoden zur Diagnose der Strongyloidiasis erforderlich. Als Folgemaßnahme zu einer früheren Studie zum Nachweis von Strongyloides-spezifischem IgG im Urin [11] analysierten wir IgG4 im Urin zur Diagnose von Strongyloidiasis. Um die diagnostische Leistung dieser immunologischen Methoden zu bewerten und mit den standardmäßigen parasitologischen Methoden (FECT und APC) zu vergleichen, wurden auch die Konzentrationen von Strongyloides-spezifischem IgG in Urin und Serum bestimmt. Die Ergebnisse zeigten, dass der Nachweis von IgG4 im Urin eine ähnliche diagnostische Sensitivität wie IgG4 im Serum aufwies (93,6 % vs. 91,4 %) und eine ähnliche diagnostische Spezifität aufwies (93,2 % vs. 91,0 %). Der Nachweis von spezifischem IgG4 in Urin und Serum stimmte stark mit den Ergebnissen der Stuhluntersuchung überein (Cohens Kappa-Koeffizient betrug etwa 0,8). Es gab signifikante positive Korrelationen zwischen den IgG4-Spiegeln (sowie dem Gesamt-IgG) im Urin und im Serum. IgG4 in Urin und Serum wies eine geringere Kreuzreaktivität mit anderen parasitären Infektionen auf als IgG. Die Ergebnisse legen nahe, dass Urin-IgG4 das Potenzial hat, als weitere IgG-Immunglobulin-Unterklasse für die immunologische Diagnose von Strongyloidiasis zu dienen. Darüber hinaus ergab die Befragung der Teilnehmer, dass bei den Teilnehmern der Studiengemeinschaft in der Vergangenheit keine Entwurmungsaktivität durch Anthelminthika festgestellt wurde. Daher sollte es in dieser Studie keinen Einfluss der medikamentösen Behandlung auf den Vergleich zwischen Parasitologie und Serologie geben. Tatsächlich ist es das erste Mal, dass die Teilnehmer, die durch parasitologische und serologische Methoden positiv auf Strongyloidiasis getestet wurden, eine Ivermectin-Behandlung erhielten.

Bezüglich der Dynamik dieser Antikörper bei Strongyloidiasis gab es Berichte, dass der Spiegel an spezifischem IgG im Serum ein Jahr nach der Behandlung bei S. stercoralis-infizierten Personen, die von einer medikamentösen Behandlung geheilt wurden, signifikant abnahm (basierend auf negativen Stuhltests und < 3 positiven Ergebnissen). der 5 serologischen Tests zur Serodiagnose) [32]. In ähnlicher Weise zeigten die mittels Ss-NIE/Ss-IR-basierten ELISA gemessenen Antikörperreaktionen (IgG und IgG4) bei Strongyloidiasis-Personen bei den meisten Patienten einen statistisch signifikanten Rückgang über ein Jahr nach der Chemotherapie, und bei einigen Patienten wurde eine negative Serologie festgestellt [ 33]. Ob es nach der medikamentösen Behandlung und Serokonversion einen ähnlichen Trend zum Rückgang des spezifischen IgG im Urin gibt oder nicht, bedarf weiterer Untersuchungen.

Da die Teilnehmer der Gruppen 2 und 3 aus demselben Endemiegebiet stammten wie die Strongyloides-positiven Teilnehmer der Gruppe 1, ist es wahrscheinlich, dass bei ihnen aufgrund einer einzigen Stuhluntersuchung, die in dieser Studie verwendet wurde, ein beträchtlicher Anteil falsch-negativer Diagnosen gestellt wurde. Daher wurden die seropositiven Tests bei Personen der Gruppen 2 und 3 erwartet. Darüber hinaus ist bei der Interpretation der Daten zur Infektionsintensität bei Strongyloidiasis Vorsicht geboten, da die Sensitivität von FECT beim Nachweis von S. stercoralis-Larven im Kot gering ist. Daher ist die geschätzte Infektionsintensität (Larven/Gram-Kot) auf larvenpositive Individuen beschränkt und tendiert eher zu Individuen mit hohen Larvenzahlen.

Es wurde berichtet, dass Nematodeninfektionen, einschließlich Strongyloidiasis und Filariose, eine starke IgG4-Reaktion stimulieren, die mit asymptomatischen und chronischen Infektionen einhergeht [17,18,19,20]. Wiederholte oder langfristige Exposition gegenüber dem gleichen Filariose- und Strongyloidiasis-Antigen löste einen Wechsel der IgG-Unterklasse zu spezifischem IgG4 aus [34, 35]. IgG4 kann die Umgehung der Immunantwort des Wirts durch Parasiten durch die Induktion einer Immuntoleranz unterstützen [36]. Dies kann über den Immunmodulator IL-10 und TGF-β-sekretierte Tregs erfolgen, die die Aktivität von Antigen-präsentierenden Zellen (APCs) verändern oder die Antigenpräsentation zwischen der APC und der T-Zelle stören [37]. Darüber hinaus kann ein Vorherrschen von IgG4 IgE-Antworten entgegenwirken [38, 39], was zu einer verringerten Aktivierung der antikörperabhängigen zellvermittelten Zytotoxizität (ADCC) führt [40]. Es ist auch bekannt, dass IgG4 mit IgE um die Antikörperfixierungsstellen auf Mastzellen und Eosinophilen konkurriert, was zu einer Hemmung der Degranulation führt [39, 41]. Daher spielt IgG4 eine wichtige Rolle bei chronischer Strongyloidiasis und hat bei der Serodiagnose große Aufmerksamkeit erhalten.

Die Verwendung von S. ratti als heterologes Antigen zur Serodiagnose von Strongyloidiasis ist aufgrund der einfachen und sicheren Antigenherstellung sowie der hohen Empfindlichkeit gegenüber S. stercoralis vorzuziehen [12]. Darüber hinaus ist das rekombinante Antigen von S. stercoralis (ieNIE) für Massenscreenings im endemischen Feld nicht allgemein verfügbar. Zur Unterstützung der Verwendung des S. ratti-Antigens zeigten unsere Ergebnisse, dass eine gleichzeitige Infektion von S. stercoralis mit O. viverrini keinen Einfluss auf die Serodiagnose von Strongyloidiasis durch IgG4 aus einem auf S. ratti basierenden ELISA hat. Das Ergebnis, dass IgG im Urin eine höhere Empfindlichkeit aufwies als IgG4 im Urin, hängt möglicherweise mit der höheren Konzentration von IgG-Antikörpern als IgG4-Antikörpern im Urin und auch im Serum zusammen. Über den Nutzen von Strongyloides-spezifischem IgG4 als Serumbiomarker für die Diagnose menschlicher Strongyloidiasis wurde unter Verwendung verschiedener Plattformen, einschließlich der Lateral-Flow-Assay-Methode [22,23,24,25] und ELISA [20, 33], ausführlich berichtet. Es wurde berichtet, dass die Empfindlichkeiten von IgG4 geringer waren als die von IgG, die Spezifität jedoch höher war (dh die Spezifität stieg um 13,3 %) [18]. Der Nachweis von Strongyloides-spezifischem IgG4 durch ELISA auf Basis von S. stercoralis-Antigenen zeigte eine Sensitivität von 96 % und eine Spezifität von 93 %; Daher eignet sich diese Methode zur Immundiagnose von Strongyloidiasis bei alkoholkranken und nichtalkoholischen Personen [42]. Unter Verwendung rekombinanter Antigene (NIE/SsIR) ergaben die IgG- und IgG4-basierten Tests Sensitivitäten von 92 % bzw. 81 % und Spezifitäten von 91 % bzw. 94 % [20]. Gemischte rekombinante Antigen-ELISAs mit Ss-NIE/Ss-IR für den IgG- und IgG4-Nachweis ergaben eine ähnliche Sensitivität und Spezifität [33]. Das Ergebnis, dass IgG im Urin eine höhere Empfindlichkeit aufwies als IgG4 im Urin (siehe Zusatzdatei 1: Tabelle S1), könnte auf die höheren Serumkonzentrationen von IgG als IgG4 zurückzuführen sein [35], und es wird erwartet, dass eine ähnliche Situation bei IgG4 auftrat im Urin. Dennoch deuten die Ergebnisse unserer Studie darauf hin, dass Urin-IgG4 quantitativ gemessen werden kann und eine ähnliche diagnostische Leistung wie Serum-IgG4 für die Diagnose von Strongyloidiasis bietet.

Wir entdeckten Kreuzreaktionen für Strongyloides-spezifisches IgG4 bei 3 von 37 Personen (8,1 %) im Urin und bei 5 von 37 Personen (13,5 %) im Serum von Personen mit O. viverrini. Ähnliche Kreuzreaktionsraten mit Taenia spp. wurden im Urin (1 von 4) und im Serum (2 von 4) beobachtet. Für Strongyloides-spezifisches IgG wurde eine Kreuzreaktion mit O. viverrini in 4 von 37 (10,8 %) Urinproben und 5 von 37 (13,5 %) Serumproben beobachtet. Über eine ähnliche Kreuzreaktivität von Serum-IgG mit Proben aus einer O. viverrini-Infektion (13–25 %) wurde berichtet [11, 12]. Im Fall von IgG4 berichtete eine frühere Studie auch, dass IgG4 im Serum, das zur Diagnose von Strongyloidiasis verwendet wurde, mit Filariose kreuzreagierte (4/55 Teilnehmer): Die Kreuzreaktivität war höher (10/55) für IgG (9 Filariose- und 1 Trichostrongyliasis-Patienten). ) [18]. Diese Ergebnisse wurden als möglicherweise Hinweis auf eine gleichzeitige Strongyloidiasis mit anderen parasitären Infektionen interpretiert, insbesondere mit O. viverrini, das häufig im Nordosten Thailands vorkommt [28]. Ein weiterer möglicher Grund ist, dass möglicherweise eine S. stercoralis-Infektion vorliegt, die jedoch bei der Stuhluntersuchung nicht festgestellt wurde. Tatsächlich ergaben die kreuzreaktiven Fälle mit O. viverrini für IgG4 in Urin und Serum schwach positive Ergebnisse, da die Antikörperspiegel < 10 % über den Grenzwerten lagen. Es gab niedrigere Kreuzreaktionsraten für IgG4 in Urin und Serum als für IgG in denselben klinischen Proben. Der Mangel an zusätzlichen Kreuzreaktivitätsstudien zu anderen Parasitenarten (z. B. Schistosoma mansoni, Hakenwürmer, Filariennematoden, T. trichura) stellt eindeutig eine Einschränkung unserer Studie dar, und eine intensivere Kreuzreaktivität sollte weiter untersucht werden.

Der Weg, über den Strongyloides-spezifische Antikörper in den Urin gelangen, ist nicht vollständig bekannt. Theoretisch könnten diese Antikörper aus dem in der Niere lokalisierten Immunkomplex stammen und durch Komplementaktivierung, Leukozyten-Chemoattraktion und Entzündung eine Pathologie im Glomerulus induzieren, was zu einer Schädigung der glomerulären Barriere führt und den Übergang von Makromolekülen in den Urin ermöglicht [43,44,45] . In jedem Fall ist der Antikörpernachweis im Urin bei Strongyloidiasis-Fällen konsistent und zuverlässig für die Diagnose, wobei die diagnostischen Werte mit denen vergleichbar sind, die auf dem Serumnachweis basieren [11, 12] und bei Opisthorchiasis [43].

Humane Strongyloidiasis ist ein ernstes Problem der öffentlichen Gesundheit, das eine Früherkennung mit hocheffizienten, aber einfachen Diagnosemethoden erfordert. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass der Nachweis von IgG4 im Urin mithilfe einer ELISA-Plattform ein alternatives diagnostisches Instrument für Human-Strongyloidiasis ist, das hinsichtlich Sensitivität und Spezifität eine ähnliche Leistung wie der Nachweis von Serum-IgG4 aufweist. Die Entnahme von Urinproben ist nichtinvasiv und Urinproben sind viel einfacher zu handhaben als Blutproben. Urin-ELISA kann für routinemäßige Laboranalysen, epidemiologische Studien und die Umsetzung öffentlicher Gesundheitskontrollprogramme gegen Strongyloidiasis verwendet werden. Weitere Studien sind erforderlich, um die Genauigkeit von IgG4-Biomarkern aus Urin zur Messung der Wirksamkeit einer anthelmintischen Behandlung mit Ivermectin bei S. stercoralis-Infektionen in endemischen ländlichen Gemeinden zu bewerten.

Die während der aktuellen Studie generierten und/oder analysierten Datensätze sind auf begründete Anfrage beim jeweiligen Autor erhältlich.

Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Technik der Agarplattenkultur

Formalin-Ethylacetat-Konzentrationstechnik

Immunglobulin G

Immunglobulin G4

Cohens Kappa-Koeffizient

Korrelationskoeffizient

95 %-Konfidenzintervalle

Fläche unter der Kurve

Betriebscharakteristik des Empfängers

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Referenzen herunterladen

Wir danken Prof. David Blair für die Bearbeitung des Manuskripts durch die KKU-Publikationsklinik der Khon Kaen University. Wir danken den Teilnehmern im Unterbezirk Thung Chomphu, Bezirk Phuwiang, in der Provinz Khon Kaen für ihre Unterstützung und Mitarbeit bei der Feldforschung.

Dieses Projekt wird vom National Research Council of Thailand (NRCT) finanziert. PS wird vom National Science, Research and Innovation Fund (NSRF) im Rahmen des Basic Research Fund der Khon Kaen University durch das Cholangiocarcinoma Research Institute (CARIBRF64-50) unterstützt; The Wellcome Trust, 215919/Z/19/Z.

Biomedizinisches Wissenschaftsprogramm, Graduiertenschule, Khon Kaen University, Khon Kaen, Thailand

Phattharaphon Wongphutorn

Abteilung für Erwachsenenpflege, Fakultät für Krankenpflege, Khon Kaen University, Khon Kaen, Thailand

Chanika Worasith

Fakultät für öffentliche Gesundheit, Kasetsart-Universität Chalermphrakiat, Campus der Provinz Sakon Nakhon, Sakon Nakhon, Thailand

Kulthida Y. Kopolrat

Cholangiokarzinom-Forschungsinstitut, Khon Kaen-Universität, Khon Kaen, Thailand

Chutima Homwong & Paiboon Sithithaworn

Fakultät für assoziierte medizinische Wissenschaften, Khon Kaen University, Khon Kaen, Thailand

Jiraporn Sithithaworn, Anchalee Techasen und Patcharaporn Tippayawat

Abteilung für Parasitologie, Medizinische Fakultät, Khon Kaen University, Khon Kaen, Thailand

Chatanun Eamudomkarn, Opal Pitaksakurat, Nuttanan Hongsrichan und Paiboon Sithithaworn

School of Biodiversity One Health and Veterinary Medicine, University of Glasgow, Graham Kerr Building, Glasgow, Großbritannien

Thomas Crellen

Wellcome Centre for Integrative Parasitology, University of Glasgow, Sir Graeme Davies Building, Glasgow, Großbritannien

Thomas Crellen

Big Data Institute, Li Ka Shing Centre for Health Information and Discovery, Universität Oxford, Oxford, Großbritannien

Thomas Crellen

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PW und PS haben die Studie konzipiert. PS, JS, PW trugen zur Konzeption und Gestaltung der Studie bei. PW, PS und JS haben das Studienprotokoll entworfen. PW, CW und KYK führten die Feldarbeit für Probensammlungen und Probenanalysen durch. CE, AT, PT, NH, OP, JS und PS schlugen die Forschungsmethodik und Datenanalyse vor. KYK und PW haben das Manuskript verfasst. PS und TC validierten die Datenanalyse und -interpretation. PS hat das Manuskript hinsichtlich seines intellektuellen Inhalts kritisch überarbeitet. Alle Autoren haben das endgültige Manuskript gelesen und genehmigt. PS ist Garant des Papiers.

Korrespondenz mit Paiboon Sithithaworn.

Das in dieser Studie verwendete Protokoll für menschliche Probanden wurde vom Human Ethics Committee der Khon Kaen University, Thailand, genehmigt (Referenznummer: HE654013). Von einzelnen Probanden im Unterbezirk Thung Chomphu, Bezirk Phuwiang, in der Provinz Khon Kaen im Nordosten Thailands wurde eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt. Der Umgang mit Labortieren und die Strongyloides-ratti-Antigenproduktion bei Wistar-Ratten wurden vom Institutional Animal Ethical Committee der Khon Kaen University (IACUC-KKU-99/62) genehmigt. Das Verfahren wurde in strikter Übereinstimmung mit den Richtlinien für die Pflege und Nutzung des Labors durchgeführt Tiere des National Research Council of Thailand.

Unzutreffend.

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden Interessen haben.

Springer Nature bleibt neutral hinsichtlich der Zuständigkeitsansprüche in veröffentlichten Karten und institutionellen Zugehörigkeiten.

Positive Raten von Strongyloides stercoralis, bestimmt durch spezifischen IgG4- und IgG-Nachweis in verschiedenen parasitären Infektionsgruppen basierend auf einer Stuhluntersuchung (APCT und FECT).

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Nachdrucke und Genehmigungen

Wongphutorn, P., Worasith, C., Kopolrat, KY et al. Diagnostische Leistung des Strongyloides-spezifischen IgG4-Nachweises im Urin zur Diagnose menschlicher Strongyloidiasis. Parasites Vectors 16, 298 (2023). https://doi.org/10.1186/s13071-023-05935-6

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Eingegangen: 12. März 2023

Angenommen: 16. August 2023

Veröffentlicht: 28. August 2023

DOI: https://doi.org/10.1186/s13071-023-05935-6

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